改良焦性没食子酸法培养厌氧菌介绍

1 .. 材料与方法 ( 1) 普通焦性没食子酸法: 将厌氧菌接**血琼脂平皿上, 在该平皿盖的外侧面中央放直径4 cm 左右的圆 
形纱布两层, 其上放焦性没食子酸0..2 g 再盖同等大小纱布两层, 然后加质量分数10%NaOH 溶液0..5 mL, 迅 
速将平皿倒置于其上, 平皿周围用溶化石蜡封闭, 放37 .. 培养24~ 48 h 后取出观察。 ( 2) 改良焦性没食子酸法: 于上述普通方法基础上, 在血琼脂平皿配制和培养用化学品的组成方面加以改 
良, 一是用滤纸制成小袋, 袋内含适量碳渣代替纱布或棉花; 二是用无水碳酸钠代替氢氧化钠; 三是在配制血 
琼脂平皿时, 加入少量葡萄糖, 终质量浓度为2 g/ L。其方法为先用滤纸制成小袋3 cm .. 5 cm, 每袋含量为焦 性没食子酸0..5 g、无水碳酸钠0..5 g 、碳渣2..5 g, 分别研磨成碎粉, 临用时再混合, 装入袋内, 胶水封闭, 将袋放 
入该平皿盖的外侧面中央, 迅速将平皿倒置于其上, 其余方法同上。 2 .. 结果 
.. .. 厌氧菌在普通焦性没食子酸法培养基中, 经37 .. , 培养48 h 后, 破伤风杆菌在血平皿上分离出单个不规 
则形菌落, 有明显溶血环。但放置室温48 h 后, 整个平皿溶血, 溶血环消失, 平皿内水分较多。产气荚膜杆菌 
在培养24 h 后, 分离出单个菌落, 有明显溶血环, 但典型双层溶血环不太明显。 
破伤风杆菌在改良的焦性没食子酸法培养基中, 经37 .. , 培养48 h 后, 血平皿上分离出非常典型的单个 
不规则菌落, 中心紧密, 四周疏松, 边缘不整齐, 有明显溶血环, 环呈多角形。产气荚膜杆菌在培养24 h 后, 明 
显分离出单个菌落, 直径2~ 5 mm, 半透明, 表面光滑, 边缘整齐, 在血平皿上可见清晰的双层溶血环, 内环完 
全溶血, 外环不完全溶血, 放置室温48 h 后仍保持典型培养特性[ 2] 。 3 .. 讨论 
.. .. 从改良前后培养厌氧菌比较可  
                              
                     以看出, 改良后在血平皿上培养破伤风杆菌能分离出非常典型的单个不规 
则形菌落, 有明显溶血环; 产气荚膜杆菌在培养24 h 后, 明显分离出单个菌落, 在血平皿上可见清晰的双层溶 
血环, 内环完全溶血, 外环不完全溶血, 在鉴别厌氧菌上具有重要意义。特别是培养好后的平板, 可以在无菌 

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