正确安装厌氧培养箱的方法介绍

用    途: 
         用于乳酸菌饮料中乳酸菌的菌落计数(GB/T16347-1996,GB/T4789.35-2003)。 原    理: 
         大豆蛋白胨、牛肉膏粉和酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖和乳糖为可发酵糖类提供碳源;乳酸菌发酵糖产酸使菌落周围碳酸钙溶解,以辨别乳酸菌;琼脂是培养基的凝固剂;中性红为pH指示剂。 配方(每升): 大豆蛋白胨5g 牛肉膏粉5g 酵母膏粉5g 葡萄糖20g 乳糖20g 碳酸钙10g 琼脂15g 中性红0.05g 
最终pH6.0±0.2  保加利亚乳杆菌 As1.1482  良好 
平皿底为粉红色,菌落较小,圆形,红色,边缘似星状,直径2±1mm,可有淡淡的晕 乳链球菌      良好 
平皿底为粉红色,菌落较小,圆形,红色,边缘整齐,可有淡淡的晕 
正确安装厌氧培养箱的方法: 
    1. 厌氧培养箱应安放在温差较小、操作方便的位置,应避免阳光直晒和远离采暖设备,放置平稳; 
    2. 将混合气瓶、氮气瓶安放平稳,并分别装好减压阀(含压力表),安置在适当位置;     3. 接上气路并检查气路,为防止漏气,必要时可在各接管处用密封胶粘合; 使用 
(一)操作室厌氧环境形成: 
    1. 按使用要求放置好必要的附件和器具,并向操作室内放入二个无毒塑料袋;     2. 通电源开照明灯,开温控仪,调节所需温度及安全温度; 
    3. 操作室内放入1000g钯粒(封闭)和500g干燥剂,并放入美兰指示剂(封闭); 4. 关紧取样室内外门,并抽真空校验;     5. 操作室内第一次置换(氮气置换): 
       A. 先用橡皮管插入操作室内进气口,另一头插入塑料袋; 
       B. 接通氮气进气路,打开氮气控制阀1,使二只塑料袋充足氮气,关闭阀门1,然后扎紧袋口; 
       C. 把乳胶手套套在观察板法兰圈上并扎紧; 
       D. 把塑料袋内氮气渐渐放于操作室内,至全部放出。 
     6. 操作室第二次置换(氮气置换)重复一次充氮过程,取样室先抽真空,并注意随时用脚踏开关开闭排气。 
     7. 操作室第三次置换(混合气体置换):(混合气体配比为N2 85%、H2 10%、CO2 5%)        A. 调换气路打开混合气阀3进气,充气时取样室先抽真空,并随时用脚踏开关开闭排气; 
       B. 混合气充满塑料袋后,关掉混合气阀,并打开阀5,使混合气经过流量计,调整流量计,流量为每分钟10ml左右; 
       C. 把塑料袋内混合气渐渐排于操作室内; 
       D. 通过三次换气后,操作室内气体含氧量已处于极微量状态。 
     8. 操作室内打开粑粒除氧剂,接通除氧催化器电源进行催化除氧,一小时后开美兰指示剂(美兰安瓶)观察其变色情况,不变色为操作室内达到厌氧环境;      9. 开紫外线灭菌灯,室内进行灭菌处理,灭菌时间按具体实验自定。  (二)菌种的置入和培养:      1. 检查取样室内门并关紧之; 
     2. 打开取样室外门,将菌种放入取样室后即关上外门; 
     3. 取样室充氮置换三次过程:打开真空泵,先抽真空度500ml汞柱(66kPa)以上停,然后人工打开氮气阀2进气,使指针回复零位,关掉阀2。第二次重复操作一次。第三次操作时,使真空度500ml汞柱(66kPa)以上停,然后打开阀4进混合气,使指针回复零位,后掉阀4。取样室充氮置换三次过程结束;      4. 如选定真空度较低就需要增加置换的次数; 
     5. 取样室内外门开启、关紧,再抽低真空度100ml汞柱(13kPa)检验; 
     6. 厌氧培养箱需要长期连续使用的条件: A. 每天在操作室内打开美兰指示剂观察,如不正常就必须重新换气; B. 要长期连续输入微量的混合气体,使补进的氮气能和微量的氧
 
 
结合通过催化吸收,保证室内厌氧状态,补入混合气流量选定为每分钟10ml左右; C. 连续培养运行一天,更换一次除氧剂和干燥剂。院      7. 操作室内培养室内室温度可任意选择和控制。 
     8. 混合气瓶、氮气瓶输出压力调整:调节减压阀,使输出压力0.1Mpa左右。 注意事项 
     1. 仪器尽可能地安装于空气清净、温度变化较小的地方; 
     2. 开机前应全面熟悉和了解各组成配套仪器、仪表的使用说明,掌握正确使用方法;      3. 培养物放入必须是在操作室内达到绝对厌氧环境后放入; 
     4. 如发生故障(停气等原因)操作室内仍可保持12小时厌氧状态(超过12小时则根据需要把培养物取出另作处理);      5. 经常注意气路有无漏气现象; 
     6. 调换气瓶时,注意要扎紧气管,避免流入含氧气体;      7. 真空泵按要求使用,定期检查加油。 

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