二氧化碳培养箱:细胞,组织培养和微生物测试的主要部分

二氧化碳培养箱是从事细胞或组织培养的传统生物实验室的支柱。孵育器提供了设计成模拟细胞的天然环境的稳定环境:pH 7.2-7.5,温度37℃,相对湿度约95%。控制约5%的CO 2 浓度以匹配生理条件并维持恒定的pH。

在需要维持,扩增或培养细胞的几个小时到许多周期的任何地方使用孵育器。常见的应用包括用于细胞库,病毒学,微生物测试(环境和医学/诊断),小规模生产细胞产物(蛋白质,基因,毒素,病毒),体外受精和药物测试的制造细胞的扩展。非常大体积的应用如临床微生物学通常使用大的覆盖培养箱

Sanyo(Wood Dale,IL)战略发展和营销经理Deepak M. Mistry指出,生物治疗和干细胞研究的上升为高性能二氧化碳培养箱带来了额外的需求。“属于药品生产质量管理规范(GMP)的应用程序,采用高度监管的协议,广泛使用培养箱。

验证培养箱操作和清洁受管制工作的需要是对培养箱内部条件的严格控制背后的驱动力。当有人打开门来引入或取出样品时,培养箱内的条件快速变化。在一些情况下,细胞的健康或活力可能受损。Mistry告诉实验室经理,“与培养箱一样,条件的一致性是培养箱的一个问题。三洋和其他公司使用红外传感器,自动测量CO 2浓度并启动气体浓度的重新平衡。

保持清洁

保持培养箱内的清洁是最重要的,特别是对于同时容纳几个细胞系或快速改变样品的单元。毕竟,培养箱不仅为感兴趣的细胞提供理想的生长条件,而且为侵入性真菌,酵母和细菌提供理想的生长条件。

传统上,通过热或紫外(UV)光实现消毒。热是有效的,但是是能量密集的并且施加材料的应力。紫外线也能很好地工作,但只在视线上:没有直接照射的角落和裂隙可能仍然受到污染。

三洋已经率先使用过氧化氢气体进行培养箱消毒。气体渗透箱内的每个表面区域并提供接近100%的病原体杀灭。该公司声称,在去除细胞,清洁和引入新细胞之间的循环时间在过氧化物消毒后大约两小时。

几家供应商制造过氧化物灭菌设备,这些设备在细胞培养,药物和食品安全工作中正在进行。Mistry提到两个:Steris(Mentor,OH)和Bioquell(Hampshire,UK)。

保持研究或生物制造中使用的培养细胞的健康是至关重要的 - 不仅是在培养箱中,而且在使用和储存期间。“由于细胞系可能需要几周或几个月的时间,它们非常昂贵,”Mistry说。“用户希望他们离开培养箱后可以活几个月。

大卫·克雷格,在产品经理粘结剂(波希米亚,纽约州),看到了三气培养箱,这是传统的二氧化碳的需求不断增加2结合了氧气控制设备。氧气通常在15体积%和20体积%之间; 这里O 2低至0.2%。

术语“三气体”是指用于CO 2,氮气和氧气的单独的连接。“低水平是通过注入氮气驱出氧气实现的,”Craig说。

三气体单元在处理在特定大气条件下蓬勃生长的组织的生物学和肿瘤学实验室中是流行的。例如,它们用于在较低氧浓度下在低氧和干细胞下生长的癌细胞。组织再生研究的爆炸是培养箱制造商的福音。“这个想法是复制生理生长条件。

很多热空气

BINDER专门从事热空气灭菌,发生在180°C。根据Craig,灭菌提供最强大和可靠的清洁。“下一个最接近的,在140度去污,不会删除一切,而消毒在90度只是敲落一些生物。你需要至少170度,以消除不仅仅是微生物和细胞,而是DNA。

热空气灭菌实际上消除了冷凝 - 微生物的繁殖地,并且不需要使用HEPA过滤。HEPA单元是昂贵的,并且是另一种潜在的污染源。

也许最有吸引力的灭菌的特点是,它发生无需用户干预。“你完成一个实验,按一个按钮,第二天早上你准备好了,”克雷格说。灭菌周期仅需10小时。清洁培养箱通常包括拆卸,高压灭菌部件和手洗。

“重要的是要记住,CO2培养箱不只是生长你想要的东西; 他们也成长你不想要的东西,“Craig说。

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