二氧化碳培养箱:污染和关键操作问题

产品聚焦CO2培养箱

实验室管理者寻找培养箱的**个问题是,干燥或加湿的培养箱是否会满足他们的需求。这两种设计都有其优点和缺点。加湿的二氧化碳培养箱提供对细胞培养条件(例如温度,气体混合物和当然的湿度)的更严格的控制。

污染,操作关键问题

用户必须在干燥培养箱中密封培养皿以防止蒸发。水盘减轻了这种要求,但也可能吸引微生物污染物。对于非加湿设计,专家建议用无菌蒸馏水给水盘加水。自来水含有氯,腐蚀不锈钢和铜; 去离子(1型)水在从其金属和玻璃构造组件中吸取离子方面具有极强的侵蚀性。

制药和生物技术行业是潮湿培养箱的主要市场切入点。今天,学术,环境和食品实验室也认识到他们的好处。即使微孔板在潮湿的培养箱中也不会失去流体蒸发。

加湿设计更加昂贵和复杂,对于许多应用,干燥的培养箱将很好地服务。Eppendorf(Enfield,CT)CO2培养箱产品经理Linette Philip 指出,干燥培养箱对非生物应用(例如电子和材料科学)有意义。“在温度和大气控制足够的地方,它们仍然有用。

 

不如果,但是当

Thermo Fisher Scientific(美国北卡罗来纳州阿什维尔)全球细胞培养专家Mary Bates说,污染控制是二氧化碳培养箱**重要的操作或维护问题。在她与来自世界各地的细胞培养专家的许多讨论中,接近90%的人说他们在上一年经历了**少一次污染。人类是迄今为止污染微生物的主要来源。大约30%的污染来自细胞系,培养基和实验室器皿,而70%来自人类或实验室环境。

除了灭菌不充分的情况外,所有污染源自培养箱外。“你的培养箱没关系,微生物在我们的呼吸,不断地从我们的身体,”贝茨说。“但是如果我不得不选择一个因素负责重复污染,那将是空气管道。

她建议实验室管理人员保持培养箱远离空气管道。当这是不可能的,用户应密切监测空气过滤器,并应考虑清洗管道作为可能的污染源。在某些情况下,设施管理人员可能能够关闭或重定向管道系统。

水盘或水箱中的水应**少每周用无菌蒸馏水更换一次。Bates警告不要使用超纯水或去离子水。“这对于许多应用来说是很好的,但是因为它不含盐,它会从容器中吸出离子,导致腐蚀。”用户甚**不要在培养箱中使用漂白剂或其他腐蚀性消毒剂。“任何对你不好的东西对细胞都是坏的。”第四铵盐是好的,因为它们不会释放出挥发物。

按SOP规则?

标准操作程序(SOP)在今天的培养箱用户群中占据主导地位,BINDER公司(波希米亚,纽约州)总裁Uwe Ross说。因此,许多实验室认为没有必要了解这些协议的科学基础。

“SOP可能会说,每两三个星期或十二个星期清空和清洁一个培养箱,所有组件都要进行高压灭菌,”Ross说。“如果这是SOP要求,这是用户做的。但他们应该考虑为什么SOP作者选择了特定的时间表,什么事件可能作为合理的触发器进行清洁。

每个组织都有自己的SOP。大学,制药公司和实验室主任使用自己或由供应商提供或提供的协议。但在太多情况下,SOP不适用于现实操作。“他们是由知道他们在做什么的人写的,对于相信他们不需要知道为什么SOP要求一定的清洁时间框架的人,”罗斯说。

大多数实验室经理会同意,例如,一个好的清洁时间是当一个实验或过程结束时,在下一个开始之前。这有效地消除了在刚刚完成的实验期间可能出现的污染性微生物 - 已知的或未知的。Ross说,一个僵化的基于时间的SOP不会反映这种触发。

“显然,我们在CO2培养箱世界中对SOP的方法已经过时,”Ross总结说。“实验室应该依赖内部质量方法,并在新过程开始时将其清洁或灭菌。结果会更好的结果。

菲利普提供了相反的。“这是一个实验室工人不喜欢的文书工作。但是SOP在细胞培养或任何实验室中都非常有价值。它们简化了操作,并在常见任务(如清洁和验证)中提供了一定的可重复性,“她说。这并不意味着SOP是用石头写的。“SOP是应该定期审查的活期文件。”SOP的年度或半年重新评估迫使实验室经理根据**终用户的投入来检查SOP是如何工作的,**终目标是改进流程。“只要SOP被允许发展,没有理由他们应该侵犯独立思考或创造力。

购买决定

Philip建议实验室经理在获得二氧化碳培养箱时评估短期和长期需求。“将此购买视为投资。展望三到五年。如果你预计需要控制氧气或湿度,相应地计划。

所有权成本是另一个要考虑的因素。许多培养箱具有某种自动或半自动清洁系统,但是相关的能量和材料成本可能显着不同。每三个月进行一次成本效益的清洁可能不是每两周清洁方案。

**后,为了节省时间和精力,菲利普建议在线进行初步评估。“这些天有很多信息。花20分钟阅读它,并比较不同的供应商提供的。

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