关于二氧化碳培养箱的观点

主支细胞培养室

CO2培养箱/新Brunswick S41i / Eppendorf   
CO2培养箱/ CO2CELL BMT USA 

实验室经理根据经验和个人品味指定这些设计。在水套培养箱中工作良好的方法很可能保留在这种类型的设备中。

水夹套培养箱以温度稳定性而闻名,但是比直接加热单元更慢地回到温度设定点,比如打开门之后。在电源故障的情况下,水套培养箱保持更长时间,但在电源恢复后需要更长时间才能恢复到设定点。由于水套,它们对于给定的工作体积也更大和更重。

水套单元的维护也有些复杂。用户必须向夹套水中添加除藻剂,这些培养箱不能采用高热消毒。无论如何,实验室倾向于坚持过去的工作,这保证了尽管失去了直接加热培养箱的一些市场份额,对水套装置的需求不会很快消失。

许多直接加热孵育器现在是无风扇的,这提供了几个好处。BMT USA(蒙罗,华盛顿州)科学部门业务发展经理Rick Ellison解释说:“通过自然对流移动空气而不是通过风扇强迫空气移动,可以减少冷凝和交叉污染。无风扇设计还通过消除清洁进入空气的HEPA过滤器的替换来减少维护,因此消除了由风扇本身引起的任何清洁或污染问题。

使用培养箱,机械复杂性越小越好。“其他设计可能同样有效,但他们引入更多的变量,”埃里森说。“变量越少,出现错误的可能性越低。

 

设置,保养,使用

物理位置是确保二氧化碳培养箱高性能的关键。Eppendorf(Enfield,CT)的产品经理Lynn Philip建议保持培养箱远离通风口和阳光直射,这两个因素都会产生大气变化,从而影响培养箱并缩短其使用寿命。“通风吃水也携带细菌和真菌污染物,”菲利普警告。

CO2培养箱/ CellIQ™/ Panasonic Healthcare /  
无论使用中央气体系统还是单个气体罐,用户都应在CO2入口安装在线压力调节器,以确保气体以推荐的方式供应最小压力。根据菲利普,根据最佳压力可能导致性能降低和恢复缓慢,而太高的压力可能损坏气体系统。“另外,尽量减少开门的频率和长度,以保持最佳的细胞培养环境,”她说。“分开的内门可以减少开门过程中文化气氛的损失。

现在几乎所有的培养箱都配备了自清洁技术。最常用的是高热消毒,这是免费的。对于常规维护,飞利浦建议用70%异丙醇或制造商推荐的消毒剂清洁。

保持卫生

说污染和/或交叉污染是什么时候的问题,而不是如果变成陈腔滥调。所有更多的理由实验室为这种可能性做准备。

埃利森推荐的系统具有“强大的灭菌,而不仅仅是净化”。BMT的灭菌技术的选择是干热高温的应用,但其他方法可能是有效的。不管选择什么方法,它应该是尽可能自动化的(因此是防错的)。高热比较低温化学或过氧化氢灭菌需要更长时间,但实际上不需要用户干预。

CO2培养箱/ C和CB系列BINDER / 
硼硅酸盐玻璃培养管Denville Scientific 

过氧化氢灭菌可以基于减少的停机时间来证明。该技术涉及将过氧化物气体引入室中,然后使其循环通过内部鼓风机。该技术与热相比的缺点是表面和内部必须与气体接触。最终操作涉及用窄带宽紫外光激活。制造商声称不需要高压灭菌,因为所有组分在整个过程中保留在外壳内。但正如埃里森所指出的,过氧化物灭菌留下一些残留的无菌水,长期不保持原始状态,需要人工去除。然而,制造商要求用于过氧化氢灭菌的约2小时的停机时间,对于高热量的14小时。

Binder公司(Bohemia,NY)的总裁Uwe Ross将目前正在进行的污染讨论比作“打死一匹死马”。但是去污方法的扩散表明问题仍未解决。“就个人而言,我相信在180°C的热空气灭菌是唯一真正有效的方法,但即使这种技术也无法解决使用过程中灭菌后发生的情况。

污染来自生物体沉积在表面上并在冷凝的辅助下生长。这导致将工作表面积减小到绝对最小值的设计方法; 较少的表面等于微生物生长的较少空间。

二氧化碳培养箱将做它的工作,以保护实验或过程,但只有当操作者遵循最佳实践。在其细胞培养的优秀引物中,Invitrogen提出以下污染预防剂:

  • 用70%乙醇擦拭手,工作区域和进入工作区域的任何东西。
  • 避免直接从其工厂容器中倒入介质和试剂,并在使用后立即重新密封瓶子。
  • 遵循良好的移液实践:如有疑问,请丢弃。
  • 保持瓶子,瓶子和盘子覆盖,直到使用; 休息帽与他们的顶部。
  • 只能使用无菌玻璃器皿和设备。
  • 在工作时消除无偿呼气(唱歌,哨声),并尽可能快地进行实验。

购买时要考虑的因素

“回顾短期和长期的实验室和细胞培养需求,以确定购买的关键因素,”菲利普说。所有培养箱都可以控制温度,CO 2和可能的O2,但单位可能在设计和性能上有显着差异。如果污染是一个问题,实验室经理应特别注意培养箱的设计和时间拆卸,清洗,重新组装和消毒。“了解未来的要求,因为CO2培养箱是一项长期投资,”Philip继续说。“必须评估头五年的总体拥有成本,包括初始价格,安装,燃气使用,清洁的时间和人力,常规备件等,以确定最佳的价值。

CO2培养箱/ Heracell™240i / Thermo Fisher Scientific
制造商和最终用户强调温度均匀性和恢复到设定条件。Thermo Fisher Scientific(Asheville,NC)全球细胞培养专家Mary Kay Bates鼓励买家调查这些性能因素。“请查看温度映射和恢复数据。

在考虑回收时,说明参数是温度,气氛组成和湿度。“湿度是性能的关键,而不是每个人都喜欢,”贝茨补充说。

湿度防止水从培养基中蒸发,这导致营养物,矿物质和其他培养基成分变得更浓。“这可能会导致性能不佳,甚至死亡,”贝茨说。

在80%湿度下,蒸发比在95%湿度下高四倍,这说明为什么湿度是王。大多数实验室中发现的低湿度,空调环境空气加剧了这种影响。

精确的氧气控制已成为现代培养箱工作的另一个必要条件,特别是对于缺氧(低氧)培养物。生物体内的氧气水平比大气中的21%水平低得多。此外,所有电池具有独特的氧气需求。肝,肾和心脏细胞在生物体内在独特氧水平下最佳地发挥功能,其甚至可在器官内改变。例如,肝细胞需要介于4%和12%之间,这取决于它们与含氧毛细血管的接近程度。神经,乳腺癌和免疫细胞将迁移远离氧梯度,但中国仓鼠卵巢细胞用于生物制造不会。随着研究人员越来越需要几乎没有氧气存活的细胞,对微调氧水平的需求从未如此之大。

IPSC的衍生神经细胞/ AMSBIO / 
“缺氧文化要求在整个氧气均匀,以保证底部货架上的细胞接收相同浓度的中部或上部架细胞,”贝茨说。“你想尽可能重复生理条件。

除了温度均匀性和关键培养条件的恢复,Bates建议购买者考虑自动消毒,以节省与手动清洁和高压灭菌相关的时间和成本。例如,大型细胞培养反应器使用自动化就地清洗或现场蒸汽技术; 培养箱使用化学品和/或热。一些设计要求使用者去除内部部件并且单独地清洁或高压灭菌它们,而在其它设计中,部件被消毒就位。无论消毒方案如何,其本身不应引起污染或细胞损伤的风险。

WWW.SHYUEJIN.COM Corporation of China 2012上海跃进生化培养箱厌氧培养箱二氧化碳培养箱电热恒温鼓风干燥箱恒温恒湿箱 公司简介 联系我们

客服电话
  • 15157563004
  • 15258505380