厌氧培养的原理介绍

一、厌氧培养的原理 
  厌氧培养的原理有两方面:一是除去与培养基接触的空气中的氧气;二是增强培养基的还原能力,达到吸收容量中的氧气的目的,是微生物处于无氧的环境中。 二、实验器材   菌种:魏氏梭菌 
  培养基:卵黄琼脂培养基、疱肉培养基 
  仪器:恒温水是培养箱、干燥器、真空泵、玻璃平皿、无菌脱脂棉、透明胶 三、实验内容及方法 
  取疱肉培养基试剂管煮沸10——15分钟,感触其溶解的氧气,取出,并迅速冷却,切勿摇动,并按下列步骤操作: 
1、接种样品均质液1——2ml或10ml,置于恒温30.C的培养箱内培养五天。若无异常现象可再培养十天。若产生混浊并散发奇臭怪味或发酵形成消化肉渣(底部出现黑色沉淀)的即为疱肉培养基试管呈阳性,咋可待用。 2、从阳性疱肉培养基试管中挑出菌种(菌株),划线于卵黄琼脂平板待用。 3、将上述处理后的平板至于干燥器内,在干燥器上涂一层凡士林使其密封,用真空泵抽成真空,立刻关闭干燥器活塞 
4、在干燥器底部预先装2.0克焦性没食子酸粉末,并斜置一烧杯,其中装有200ml20%KOH溶液,当抽气完毕关闭干燥器的活塞后,轻轻摇动干燥器,使烧杯倾斜使焦性没食子酸粉末与KOH溶液互相混合,此时容器中的氧便被吸收 5、在干净的玻璃平皿底面上预先称取1g焦性没食子酸,盖上一块无菌脱脂棉,加入10%NAOH1ml,使其缓慢均匀地流入脱脂棉的四周及中心,待脱脂棉呈棕色时,迅速将待用划线卵黄琼脂培养基扣紧,接口处用宽透明胶带贴数圈(不得有气泡,保证平整) 
6、将干燥皿、干燥器放入恒温37.C的培养箱培养24小时即可。 四、实验结果   观察菌是否生长 

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