细胞培养常用设备及实验技巧(二)无菌操作

无菌室的灭菌:

1.定期打扫无菌室:每周打扫一次,先用自来水拖地、擦桌子、超净工作台等,然后用3‰来苏尔或者新洁尔灭或者0.5%过氧乙酸擦拭。

2.CO2孵箱(培养箱)灭菌:先用3‰新洁尔灭擦拭,然后用75%酒精擦拭或者0.5%过氧乙酸,再用紫外灯照射。

3.实验前灭菌:打开紫外灯、三氧杀菌机、空气净化器系统各20~30分钟。

4.实验后灭菌:用75%酒精(3‰新洁尔灭)擦拭超净台、边台、倒置显微镜的载物台。

实验人员的无菌准备:

1.肥皂洗手。

2.穿好隔离衣、带好隔离帽、口罩、放好拖鞋 。

3.用75%酒精棉球擦净双手。

无菌操作的演示:

1.凡是带入超净工作台内的酒精、PBS、培养基、胰蛋白酶的瓶子均要用75%酒精擦拭瓶子的外表面 。

2.靠近酒精灯火焰操作。

3.器皿使用前必须过火灭菌。

4.继续使用的器皿(如瓶盖、滴管)要放在高处,使用时仍要过火。

5.各种操作要靠近酒精灯,动作要轻、准确,不能乱碰。如吸管不能碰到废液缸。

6.吸取两种以上的使用液时要注意更换吸管,防止交叉污染。

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