如何确保您的二氧化碳培养箱正常工作

避免污染
 
哺乳动物细胞是在营养丰富的培养基中培养的,温度有利于几乎任何微生物的生长,无论是想要的还是不需要的。尽管许多研究人员在他们的培养基中使用抗生素和抗真菌剂作为预防污染的措施,但这并不能解决持续的方法学错误,并常常隐藏了存在问题的事实。如果可能的话,避免使用这些制剂,并努力改进您的无菌技术并开发一个系统来保持您的培养箱清洁。
 
培养箱污染的主要来源是微生物通过检测门进入。这可能是显而易见的,但将它放在**要位置将有助于您发展防止全面污染的长期习惯。在培养箱中放置物品时应戴手套,并尽量减少内部玻璃门打开的时间。偶尔用70%乙醇擦拭门把手。每周更换一次,保持湿度盘中的水清洁。定期用肥皂和水擦洗锅,然后用乙醇擦拭; 或者,高压灭菌锅。如果培养基溢出培养箱内,请取出搁板并彻底清洁。
 
这些清洁仪式的频率将取决于您培养箱获得的流量。大型实验室中的培养箱可能需要更频繁的清洁。如果你从一个干净的培养箱开始,并且注意进出的东西,它应该保持清洁数周或数月。
 
确保二氧化碳水平是应该的
大多数哺乳动物细胞培养基使用碳酸氢盐缓冲系统。二氧化碳是这个缓冲系统的重要组成部分,**保持在5%以维持介质在生理pH值。虽然基本上所有的现代化培养箱都配备了CO2传感器以保持所需的CO2水平,但随着时间的推移,校准可能会偏离设定值,需要操作员直接确定CO2水平时进行偏置重新校准。
 
测量培养箱中CO2水平的**简单和**准确的方法是使用气体分析仪,气体分析仪的操作基于待测气体的化学吸收之后的流体的体积膨胀。该设备使用室内空气(0.04%CO2)“归零”,培养箱中的空气通过门或孵化器侧的端口进行采样。
 
较旧的模型培养箱可能需要更频繁的重新校准。**好的新型号每个月执行一次CO2传感器的自动重新清零。虽然这些模型很少需要手动重新校准,但用户仍应按照其标准操作程序的规定,检查腔室二氧化碳水平。
 
保持37°C的温度
 
在我们的身体努力保持核心温度37°C的情况下,在这种温度下培养的哺乳动物细胞是**幸福的,这并不奇怪。大多数二氧化碳培养箱都配备了显示内腔温度的显示屏,但定期仔细检查一下是个不错的主意,特别是当您注意到细胞生长不理想或不常见时。这是用高质量的校准温度计**好的。打开外部和内部的培养箱门,并将温度计带到玻璃门的内部,以便在玻璃门关闭时从外部读取温度。在你离开实验室前**做这件事。第二天早上,打开培养箱的外门并读取温度计。再一次,如果读数不同于37°C(并且温度计准确),则需要重新校准板载温度传感器。
保持潮湿
 
您的培养箱内部保持在相对较高的温度下,因此培养基的蒸发在没有高湿度的情况下会成为一个真正的问题。通过将水保持在培养箱底部的托盘中,保持培养箱内相对湿度较高(90%**95%)。其缺点是充水盘是潜在的污染源。